פּראָדוקטן

טריס אַסאַטייט זאַלץ איז אָפט געניצט אין דער צוגרייטונג פון טאַע (טריס-אַסאַטייט-עדטאַ) באַפער, וואָס איז געניצט ווי אַ פליסנדיק באַפער און אין אַגאַראָסע דזשעלז.טריס אַסעטאַטע-עדטאַ באַפער איז געניצט פֿאַר דנאַ אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס אָבער איז אויך געניצט פֿאַר ניט-דענאַטורינג רנאַ אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.טאָפּל-סטראַנדיד דנאַ טענדז צו לויפן פאַסטער אין טאַע ווי אין אנדערע באַפערז און קען זיין ויסגעמאַטערט בעשאַס עקסטענדעד עלעקטראָפאָרעסיס.באַפער סערקיאַליישאַן אָדער באַפער פאַרבייַט בעשאַס עקסטענדעד עלעקטראָפאָרעסיס קענען סגולע די נידעריקער באַפערינג קאַפּאַציטעט.קענען זיין געניצט אין פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז צו לערנען די מאָביליטי פון דנאַ אין לייזונג.זינט באָראַטע אין TBE באַפער (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) איז אַ שטאַרק ינכיבאַטער פֿאַר פילע ענזימעס, TAE באַפער איז רעקאַמענדיד ווען איר זוכט אין ענזימאַטיק אַפּלאַקיישאַנז פֿאַר די דנאַ מוסטער.טריס אַסאַטייט זאַלץ איז אויך אַ באַפער מיט הויך סענסיטיוויטי אין אַטפּ אַססעס מיט פיירפליי לוסיפעראַסע.

ניצט: טאַע פליסנדיק באַפער איז די מערסט קאַמאַנלי געניצט באַפער פֿאַר דנאַ אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס, און איז אויך געניצט פֿאַר געבוירן רנאַ אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.טאָפּל-סטראַנדיד דנאַ טענדז צו מאַך פאַסטער אין טאַע ווי אין אנדערע באַפערז, אָבער אויך פיילז צו שווימען רעכט צו דיפּלישאַן פון באַפער ייאַנז בעשאַס פּראַלאָנגד עלעקטראָפאָרעסיס.באַפער סייקלינג אָדער באַפער וועקסל בעשאַס פּראַלאָנגד עלעקטראָפאָרעסיס קענען פאַרגיטיקן פֿאַר די נידעריקער באַפער קאַפּאַציטעט.2 צעפירן די קאַנסאַנטרייטאַד טאַע באַפער צו באַקומען 1 mMTAE באַפער מיט 40 מם טריס אַסאַטייט און 1 מם עדטאַ, pH 8.3.1 mMTAE באַפער קענען זיין געוויינט ביידע אין אַגאַראָסע דזשעלז און ווי אַ פליסנדיק באַפער.פֿאַר מאַקסימום האַכלאָטע, עס איז רעקאַמענדיד אַז די געווענדט וואָולטידזש איז נידעריקער ווי 5 וו / סענטימעטער (דיסטאַנסע צווישן אַפּאַראַט ילעקטראָודז).

אַפּפּליקאַטיאָן: טאַע פליסנדיק באַפער איז די מערסט קאַמאַנלי געניצט באַפער פֿאַר דנאַ אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס אין Chemicalbook געל, און עס איז אויך געניצט פֿאַר ניט-דענאַטורינג רנאַ אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.טאָפּל-סטראַנדיד דנאַ טענדז צו מאַך פאַסטער אין טאַע ווי אין אנדערע באַפערז, אָבער אויך פיילז צו שווימען רעכט צו דיפּלישאַן פון באַפער ייאַנז בעשאַס פּראַלאָנגד עלעקטראָפאָרעסיס.באַפער סייקלינג אָדער באַפער וועקסל בעשאַס פּראַלאָנגד עלעקטראָפאָרעסיס קענען פאַרגיטיקן פֿאַר די נידעריקער באַפער קאַפּאַציטעט.די קאַנסאַנטרייטאַד טאַע באַפער איז דיילוטאַד צו באַקומען 1 mMTAE באַפער מיט 40 מם טריס אַסאַטייט און 1 מם עדטאַ, pH 8.3.1 mMTAE באַפער קענען זיין געוויינט ביידע אין אַגאַראָסע דזשעלז און ווי אַ פליסנדיק באַפער.פֿאַר מאַקסימום האַכלאָטע, עס איז רעקאַמענדיד אַז די געווענדט וואָולטידזש איז נידעריקער ווי 5 וו / סענטימעטער (דיסטאַנסע צווישן אַפּאַראַט ילעקטראָודז).

ניצט: אין די דיטעקשאַן פון ייטיפּי מיט פיירפליי לוסיפעראַסע, דעם פּראָדוקט איז די מערסט שפּירעוודיק באַפער;גלוטאַמייט ביינדינג דיטעקשאַן.

דיספּלייסאַבאַל ביינדינג פון [3H] ל-גלוטאַמיק זויער צו ניט-רעסעפּטאָר מאַטעריאַלס.

[3H] ל-גלוטאַמיק זויער ביינדינג צו מיקראָפיודזש טובז און גלאז איז ינוועסטאַגייטאַד אין פיר באַפערז.הינטערגרונט ביינדינג צו די מאַטעריאַלס איז נעגלאַדזשאַבאַל, אָבער איז געוואקסן דורך סענטריפוגאַטיאָן אָדער סאַקשאַן אין טריס-הקל און טריס-סיטראַטע באַפער.דעם ביינדינג איז געווען פיל ווייניקער אָדער ווען HEPES-KOH, אָדער טריס-אַסאַטייט באַפער איז געווען געוויינט אַנשטאָט.[3H] ל-גלוטאַמייט ביינדינג צו מיקראָפיודזש טובז איז ינכיבאַטיד דורך ל- אָבער נישט די-יסאָמערס פון גלוטאַמייט און אַספּאַרטאַטע.דל-2-אַמינאָ-7-פאָספאָנאָהעפּטאַנאָיק זויער אויך האט נישט ינכיבאַט די ביינדינג.אנדערע קאַמפּאַונדז וואָס האָבן געוויזן נידעריק צו מעסיק ינאַבישאַן זענען: ען-מעטהיל-ד-אַספּאַרטאַטע, קוויסקוואַלאַטע, ל-גלוטאַמיק זויער דיעטהיל עסטער, ען-מעטהיל-ל-אַספּאַרטאַטע, קאַינאַטע און 2-אַמינאָ-4-פאָספאָנאָבוטיראַטע.ביינדינג איז ינכיבאַטיד דורך דענאַטורעד שטשור מאַרך מעמבריינז.א פּראָטעין-אָפענגיק [3H] גלוטאַמייט ביינדינג איז באקומען מיט אַ ריפּיטידלי פאַרפרוירן-טאָוד מעמבראַנע צוגרייטונג ווען ביינדינג איז געווען געטאן אין טריס-אַסאַטייט באַפער.עס איז רעקאַמענדיד אַז טריס-אַסאַטייט אָדער HEPES-KOH באַפער זאָל זיין געוויינט אין די גלוטאַמייט בין דינג אַסייַ.אויב טריס-הקל אָדער טריס-סיטראַטע באַפער איז געניצט, צונעמען קאָנטראָל עקספּערימענט זאָל זיין דורכגעקאָכט צו ריכטיק פֿאַר ביינדינג צו מיקראָפיודזש טובז אָדער גלאז פיברע פילטערס.