פּראָדוקטן

עוקאַריאָטיק סעלז אַנטהאַלטן אַ יידל וואָג פון מינוט אַמאַונץ פון די פיר דעאָקסיריבאָנוקלעאָסידע טריפאָספאַטעס (דנטפּס), גענוג בלויז פֿאַר אַ ביסל מינוט פון דנאַ רעפּלאַקיישאַן.ביידע אַ דיפישאַנסי און אַ רעשט פון אַ איין דנטפּ קען רעזולטאַט אין געוואקסן מיוטיישאַן רייץ, פאָלטי דנאַ פאַרריכטן אָדער מיטאָטשאָנדריאַל דנאַ דיפּלישאַן.dNTPs זענען יוזשאַוואַלי קוואַנטאַפייד דורך אַן ענזימאַטיק אַסיי אין וואָס ינקאָרפּאָראַטיאָן פון ראַדיאָאַקטיוו דטטפּ (אָדער ראַדיאָאַקטיוו דטטפּ אין די אַסיי פֿאַר דאַטפּ) אין ספּעציפיש סינטעטיש אָליגאָנוקלעאָטידעס דורך אַ דנאַ פּאָלימעראַסע איז פּראַפּאָרשאַנאַל צו די קאַנסאַנטריישאַן פון די אומבאַקאַנט דנטפּ.מיר געפֿינען אַז די קאַמאַנלי געוויינט Klenow DNA פּאָלימעראַסע קען פאַרבייַטן די קאָראַספּאַנדינג ריבאָנוקלעאָטידע פֿאַר די אומבאַקאַנט דנטפּ, וואָס אין עטלעכע ינסטאַנסיז פירן צו אַ גרויס אָוווערעסטאַמיישאַן פון דנטפּס.מיר איצט באַשרייַבן אַססייַ טנאָים פֿאַר יעדער דנטפּ וואָס ויסמיידן ריבאָנוקלעאָטידע ינקאָרפּעריישאַן.פֿאַר די דטטפּ און דאַטפּ אַסאַסאַז עס איז גענוג צו מינאַמייז די קאַנסאַנטריישאַנז פון די Klenow ענזיים און פון מיטן נאָמען dATP (אָדער dTTP);פֿאַר dCTP און dGTP, מיר האָבן צו פאַרבייַטן די Klenow ענזיים מיט די Taq DNA פּאָלימעראַסע אָדער Thermo Sequenase.מיר פֿאָרשלאָגן אַז אין עטלעכע פריער ריפּאָרץ ריבאָנוקלעאָטידע ינקאָרפּעריישאַן קען האָבן געפֿירט צו הויך וואַלועס פֿאַר dGTP און dCTP.